Purificacion de antigenos somaticos del Paracoccidioides brasiliensis. Estudio preliminar

Burgos, Luis C.; Cano, Luz E.; Restrepo, Angela

doi:10.1590/S0036-46651985000200003

Resúmenes

Se describen los procedimientos de purificación empleados para la separación de las fracciones antigénicas a partir de un material somático obtenido por rotura de células levaduras completas de P. brasiliensis. Dichas fracciones mostraron ser proteínas con pesos moleculares de 66 y 85 Kd; la primera de ellas reaccionó con sueros específicos produciendo una banda de precipitado idéntica a una de las 3 desarrolladas por el antígeno total. Los resultados señalan la posibilidad de obtener antígenos purificados, químicamente identificados y cuyo uso pudiera, en el futuro, representar ventajas para el diagnóstico serológico de la paracoccidioidomicosis, permitiendo separar, repetidamente, solo aquel componente reconocidamente activo.

We describe the procedures followed to purify antigenic fractions from P. brasiliensis sonicated whole yeast cells. By means of the agar gel immunodiffusion test, antigen-antibody complexes were allowed to produce precipitin lines; these were further separated, eluated and two antibody-free antigenic fractions were further purified by column chromatography and polyacrilamyde gel electrophoreses. These fractions proved to be proteins with molecular weights of 66 and 85 kd; the former reacted with specific antisera and produced a precipitin line identical to one of the three formed by the total antigen. Results indicate that it would feasible to obtain purified, chemically characterized antigens. These could, in the future, bring improvement in the serologic diagnosis of paracoccidioidomycosis as only those specific components of known serologic reactivity would be employed.

ARTIGOS ORIGINAIS

Purificacion de antigenos somaticos del Paracoccidioides brasiliensis. Estudio preliminar (^{^*} Dirección actual: Departamento de Bioquímica Facultad de Medicina Universidad del Valle, Cali, Colombia )

Purification of somatic antigens from Paracoccidioides brasiliensis. Preliminary study

Luis C. Burgos; Luz E. Cano; Angela Restrepo

Laboratorio de Micología, Corporación de Investigaciones Biológicas (CIB), Hospital Pablo Uribe, Medellín, Colombia

^{Dirección actual} Dirección actual: Departamento de Bioquímica Facultad de Medicina Universidad del Valle, Cali, Colombia

SUMARIO

Se describen los procedimientos de purificación empleados para la separación de las fracciones antigénicas a partir de un material somático obtenido por rotura de células levaduras completas de P. brasiliensis. Dichas fracciones mostraron ser proteínas con pesos moleculares de 66 y 85 Kd; la primera de ellas reaccionó con sueros específicos produciendo una banda de precipitado idéntica a una de las 3 desarrolladas por el antígeno total.

Los resultados señalan la posibilidad de obtener antígenos purificados, químicamente identificados y cuyo uso pudiera, en el futuro, representar ventajas para el diagnóstico serológico de la paracoccidioidomicosis, permitiendo separar, repetidamente, solo aquel componente reconocidamente activo.

SUMMARY

We describe the procedures followed to purify antigenic fractions from P. brasiliensis sonicated whole yeast cells. By means of the agar gel immunodiffusion test, antigen-antibody complexes were allowed to produce precipitin lines; these were further separated, eluated and two antibody-free antigenic fractions were further purified by column chromatography and polyacrilamyde gel electrophoreses. These fractions proved to be proteins with molecular weights of 66 and 85 kd; the former reacted with specific antisera and produced a precipitin line identical to one of the three formed by the total antigen.

Results indicate that it would feasible to obtain purified, chemically characterized antigens. These could, in the future, bring improvement in the serologic diagnosis of paracoccidioidomycosis as only those specific components of known serologic reactivity would be employed.

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AGRADECIMIENTO

Al Doctor Manuel Elkin Patarro.yo, del Departamento de Inmunología de la Universidad Nacional, de Bogotá, Colombia, no solo por haber-nos enseñado el manejo y las implicaciones del método PAGE-SDS sino por su interés en el presente studio.

Recebido para publicação em 18/5/1984.

(*) Trabajo realizado bajo los auspicios del Fondo Colombiano de Investigaciones Científicas y Proyectos Especiales, Coi- ciencias. Proyecto No. 97145-3-07-82

1. ANDRIEU, S.; BIGUET, J.; DUJARDIN, K. & VAUCELLE, T. Etude antigenique des agents des mycoses profondes per l'analyse comparée des milieux de culture. Mycopathologia (Den Haag) 39: 97-108, 1969.
2. CALVANICO, N. J. ; DUPONT, B.; HUANG, J.; PATTERSON, J. N.; FINK, T. N. & KUMP, N. P. Antigens of Aspergillus fumigatus. I. Purification of a cytoplasmic antigen reactive with sera of patients with Aspergillus-related disease. Clin. Exp. Immunol. 45: S62-671, 1981.
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14. RESTREPO, A. Las pruebas serológicas en la Paracoccidioidomicosis. Aceptado para publicación en: Adelantos en Microbiología y Enfermedades Infecciosas. Marzo, 1984.
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17. YARZABAL, I. A.; ALBORNOZ, M. B.; CABRAL, N. A. & SANTIAGO, A. R. Specific double diffusion microtechnique for the diagnosis of Aspergillosis and Paracoccidioidomycosis using monospecific antisera. Sabouraudia 16: 55-62, 1978.
18. YARZABAL, I. A.; TORRES, J. A. & JOSEF, M. Antigenic mosaic of P. brasiliensis. Proc. 1st. Pan. Symp. Paracoccidioidomycosis. PAHO, Scient. Publ. No. 254, Washington, D.C., 239-244.

Dirección actual:

Departamento de Bioquímica

Facultad de Medicina

Universidad del Valle, Cali, Colombia

Fechas de Publicación

Publicación en esta colección
26 Oct 2012
Fecha del número
Abr 1985

Histórico

Recibido
18 Mayo 1984

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[1] 1. ANDRIEU, S.; BIGUET, J.; DUJARDIN, K. & VAUCELLE, T. Etude antigenique des agents des mycoses profondes per l'analyse comparée des milieux de culture. Mycopathologia (Den Haag) 39: 97-108, 1969.

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[18] 18. YARZABAL, I. A.; TORRES, J. A. & JOSEF, M. Antigenic mosaic of P. brasiliensis. Proc. 1st. Pan. Symp. Paracoccidioidomycosis. PAHO, Scient. Publ. No. 254, Washington, D.C., 239-244.

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