Avaliação do uso de fator de transferência na resposta imunológica de pacientes cirúrgicos imunodeprimidos

RESUMO

Objetivo:

avaliar a ação do Fator de Transferência na resposta imunológica de pacientes portadores de neoplasia maligna submetidos à cirurgia, quimioterapia e radioterapia.

Método:

análise das variações dos valores dos leucócitos, linfócitos totais, linfócitos T e CD4 em 60 pacientes submetidos à imunoestimulação com Fator de Transferência administrado em dose única de 0,5mg por via sublingual, diariamente e iniciada simultaneamente à quimioterapia e/ou radioterapia.

Resultados:

houve um aumento no número de todas as linhagens celulares estudadas que foi mais acentuada após 12 meses de uso da medicação. A análise estatística realizada com o software Graph Pad Instat, testadas pelo método Kolmogorov and Smirnov, mostrou que os resultados foram significativos.

Conclusão:

o Fator de Transferência restabeleceu a resposta imune e não apresentou efeitos colaterais.

Descritores:
Fator de Transferência; Imunidade Celular; Invasividade Neoplásica

ABSTRACT

Objective :

to evaluate the action of Transfer Factor on the immune response of patients with malignant neoplasm submitted to surgery, chemotherapy and radiotherapy.

Method:

we analyzed the variations of leukocytes, total lymphocytes, T-lymphocytes and CD4 counts in 60 patients submitted to immunostimulation with a single, daily dose of 0.5mg sublingual Transfer Factor, started simultaneously with chemotherapy and/or radiotherapy.

Results:

there were statistically significant increases in the counts of all cell lines studied, more pronounced after 12 months of use of the medication.

Conclusion:

the Transfer Factor restored immune response and showed no side effects.

Keywords:
Transfer Factor; Immunity, Cellular; Neoplasm Invasiveness

INTRODUÇÃO

Descoberto por Henry Sherwood Lawrence, em 1955, o Fator de Transferência (FT) é um extrato obtido de células esplênicas de vitelo, constando de um polipeptídio conjugado com peso molecular em torno de 6.000 Daltons e estrutura semelhante ao RNA^1-3. O FT tem uma importante função estimuladora do sistema imune promovendo a maturação e diferenciação dos timócitos em linfócitos T; a restauração das funções dos linfócitos periféricos com deficiência funcional; a recuperação da imunidade humoral através da diferenciação dos linfócitos B, formando plasmócitos e sintetizando anticorpos humorais específicos; o aumento da capacidade de rejeição de enxertos alogênicos; a ativação “in vitro” dos linfócitos T através da ação citotóxica, da produção de linfocinas e do aumento da atividade do sistema mononuclear fagocítico (SRE). Quando administrado oralmente estabelece um contato direto com as placas de Peyer’s e com os linfonodos, onde exerce uma ação eletiva sobre os linfócitos e as células apresentadoras de antígenos. As enzimas digestivas e o ácido clorídrico não influenciam a sua estabilidade^2-4.

A primeira evidência de que o câncer surge devido às alterações genéticas somáticas veio de estudos de linfoma de Burkitt⁴. A partir de então várias doenças malignas foram associadas com os oncogens, surgindo a possibilidade da utilização de imunomoduladores como tratamento complementar à cirurgia, quimioterapia e radioterapia^5-10. Os melhores resultados do tratamento da doença neoplásica são alcançados quando se consegue a redução da carga tumoral através da cirurgia, complementada pela quimioterapia e radioterapia. No entanto estes procedimentos afetam o sistema imune, e mesmo sendo de forma temporária, acaba influenciando os respectivos esquemas terapêuticos, que algumas vezes tem que ser interrompidos devido ao baixo número de leucócitos, linfócitos e aos efeitos colaterais importantes resultantes do comprometimento da resposta imune. Os agentes imunoestimuladores têm contribuído para evitar ou minimizar estes danos colaterais, entre eles o FT, que foi usado pela primeira vez no tratamento de câncer por Fudenberg et al.¹¹, em 1976, e que também passou a ser utilizado no tratamento de doenças não neoplásicas^2,3,11.

MÉTODOS

Trabalho realizado no Hospital Universitário Gaffrée e Guinle da Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO, em 60 pacientes, de ambos os sexos, com idade superior a 30 anos, portadores de neoplasia maligna comprovada por exame histopatológico de peça cirúrgica, submetidos à quimioterapia (QT) e/ou radioterapia (RT) pós-cirurgia, acompanhados por 12 meses ambulatorialmente. A imunoestimulação foi feita com Fator de Transferência fornecido pelo Laboratório de Extratos Alergênicos Ltda. registrado no Ministério da Saúde com o número 1729.0011.001-4. A substância foi administrada em dose única de 0,5mg por via sublingual, diariamente, e iniciada simultaneamente à quimioterapia e/ou radioterapia. Todos os pacientes foram submetidos à avaliação imunológica antes de iniciar o tratamento, através de exames laboratoriais (contagem de leucócitos, linfócitos totais, linfócitos T e da subpopulação de linfócitos CD4), que foram repetidos após seis e 12 meses do início da terapia. Foi feita a comparação dos resultados dos exames de antes do início do tratamento com os realizados seis e 12 meses de uso da medicação.

Os resultados são apresentados como média e ± desvio padrão. A análise dos dados foi realizada através de tabelas e gráficos com a utilização do software Microsft Office Excell 7®. Para a análise estatística utilizamos o software Graph Pad Instat versão 3.0, San Diego Califórnia® e, para efeito de interpretação, o limite de erro tipo I foi até 5% (p≤0,05). As variáveis foram testadas pelo método Kolmogorov and Smirnov (KS), a inferência pelo teste de Wilcoxon para amostras não paramétricas e teste “t” de Student para amostras paramétricas.

O estudo foi apreciado e aprovado pela Comissão de Ética em Pesquisa de acordo com a Resolução 196/96.

RESULTADOS

Na análise estatística todas as amostras avaliadas apresentaram uma distribuição normal pelo método Kolmogorov and Smirnov (KS). As características dos pacientes analisados estão contidas na tabela 1.

Tabela 1
Distribuição das variáveis do estudo pelo número de mulheres incluídas (n=2273) .

Sexo		Faixa etária - casos (%)		Local do tumor - casos (%)
Masculino	Feminino	30-39 anos	4 96,7%)	Mama	20 (33,3%)
14 (23,3%)	60 (76,7%)	40-49 anos	15 (25%)	Intestino	18 (30%)
		50-59 anos	8 (13,3%)	Estômago	11 (18,3%)
		60-69 anos	20 (33,3%)	Pâncreas	5 (8,3%)
		+ 70 anos	13 (21,7%)	Útero	3 (5%)
				Pulmão	1 (1,7%)
				Lipossarcoma	1 (1,7%)
				Rim	1 (1,7%)

Em relação à contagem de leucócitos totais 39 (65%) pacientes apresentaram uma elevação nos valores em seis meses e 50 (83,3%) em 12 meses na comparação com o resultado de antes do início da terapia. Este aumento variou de 1,9% a 103% em seis meses e de 2,1% a 170% em 12 meses. Observou-se que dos 21 casos (35%) que tiveram redução dos valores dos leucócitos em seis meses, 18 (85,7%) conseguiram se recuperar em 12 meses, sendo que 12 (57,1%) alcançaram taxas superiores às do inicio do tratamento.

A contagem de linfócitos totais teve uma elevação em seis meses em 40 (66,7%) pacientes e em 48 (80%) casos em 12 meses. Este aumento variou de 1,5% a 85% em seis meses e de 0,2% a 137,7% em 12 meses. Dos 20 casos (33,3%) que tiveram redução dos valores dos linfócitos em seis meses, 16 (80%) conseguiram se recuperar em 12 meses, sendo que 13 (65%) apresentaram valores maiores do que aos encontrados no início do tratamento.

Analisando as médias dos valores de leucócitos da amostra, observou-se um aumento de 5,6% quando se compara as taxas de antes do início do tratamento com os de após seis meses; de 20,1% entre as do pré-tratamento e 12 meses, e de 12,4% entre seis e 12 meses de tratamento. Em relação às médias de linfócitos totais este aumento foi de 5%, 24,8% e 14,9%, respectivamente. A análise estatística destas variações se mostrou muito significativa (Tabela 2).

Tabela 2
Variações dos valores dos leucócitos e linfócitos.

Linfócitos T	Valor	Linfócitos CD4	Valor
Média		Média
Antes	1174 (±486)	Antes	732 (±279)
6 meses	1278 (±463)	6 meses	772 (±311)
12 meses	1477 (±541)	12 meses	919 (±316)
Teste t	p<0,0001 (MS)	Teste t	p<0,0001 (MS)

• Valores expressos em média, ± desvio padrão, valor de p, (MS) muito significativo.

A análise dos linfócitos T evidenciou que 38 (63,3%) pacientes apresentaram uma elevação nos valores em seis meses e 46 (76,7%) em 12 meses na comparação com o resultado de antes do início da terapia. Este aumento variou de 0,4% a 320% em seis meses e de 0,5% a 160% em 12 meses. Observou-se que dos 22 casos (36,7%) que tiveram redução na contagem de linfócitos T em seis meses, 17 (77,3%) conseguiram se recuperar em 12 meses, sendo que 11 (64,7%) alcançaram taxas superiores às do início do tratamento.

Na avaliação da subpopulação de linfócitos CD4 também ocorreu uma elevação, sendo em 35 (58,3%) casos quando se compara antes do tratamento e seis meses e em 51 (85%) casos comparando-se os valores de antes do tratamento e após12 meses. Este aumento variou de 0,6% a 162,1% em seis meses e de 0,5% a 337,1% em 12 meses. Observou-se que dos 25 casos (41,7%) que tiveram redução dos valores da subpopulação CD4 em seis meses, 19 (76%) conseguiram se recuperar em 12 meses, sendo que 16 (84,2%) conseguiram obter taxas superiores às do início do tratamento.

Ao avaliarmos as médias de linfócitos T da amostra, observa-se uma elevação de 8,8% quando se compara os valores de antes do início do tratamento com os de após seis meses; de 33,4% entre pré-tratamento e 12 meses, e de 15,6% entre seis e 12 meses de tratamento. O mesmo aconteceu em relação à subpopulação CD4 com um aumento de 5,5%, 20,6% e de 19%, respectivamente. A análise estatística destas variações se mostrou muito significativa (Tabela 3).

Tabela 3
Variações dos valores dos linfócitos T e CD4.

Linfócitos T	Valor	Linfócitos CD4	Valor
Média		Média
Antes	5073 (±1281)	Antes	1642 (±537)
6 meses	5356 (±1522)	6 meses	1742 (±580)
12 meses	6019 (±1341)	12 meses	1980 (±594)
Teste t	p<0,0001 (MS)	Teste t	p<0,0001 (MS)

• Valores expressos em média, ± desvio padrão, valor de p, (MS) muito significativo.

Ao avaliarmos as médias dos resultados dos exames no período estudado, observou-se que em todas elas houve uma elevação dos valores, que foi mais expressiva com 12 meses de tratamento, como mostra a figura 1.

Figura 1
Comparação dos resultados dos exames realizados.

DISCUSSÃO

Uma resposta imunológica deficiente favorece o aparecimento de várias doenças de origem viral, bacteriana e neoplásica. Em relação ao câncer isto se torna mais grave porque o próprio tumor, assim como o uso de QT, RT e corticoides também afetam o sistema imune acentuando ainda mais a imunossupressão. Vários imunomoduladores tem sido usados para reverter esta situação com o objetivo não só de melhorar a resposta imunológica, minimizando os efeitos colaterais da QT e RT, mas de permitir que os esquemas utilizados não sejam interrompidos, o que compromete os resultados dos tratamentos^10-20.

Os linfócitos e suas subclasses T são fundamentais para a resposta imune, especialmente quando se trata de tumores sólidos, e desta forma os trabalhos que visam ao combate a este tipo de tumor tem o objetivo de torná-los ativos e competentes^16,17,19,20. Neste trabalho observamos que os linfócitos totais assim como as suas subclasses apresentaram uma elevação dos valores, que foi mais acentuada com o uso do FT por 12 meses, e mesmo nos casos em que ocorreu redução das taxas nos primeiros seis meses de tratamento, estas foram recuperadas após 12 meses. A melhor resposta foi evidenciada pela subpopulação de linfócitos CD4, com um aumento de 80% ao final do estudo, sendo que entre os que tiveram uma diminuição inicial, 76% deles apresentaram uma elevação com 12 meses de tratamento.

Procuramos também analisar o efeito do FT sobre os leucócitos totais, e também observamos que houve um aumento dos valores em 83,3% dos casos com 12 meses de terapia e, igualmente aos linfócitos, naqueles em que se observou uma redução inicial, 85,7% apresentaram elevação das taxas após 12 meses de uso do FT.

Concluímos, assim, que o FT promoveu a ativação de leucócitos, linfócitos totais e suas subclasses, acarretando um estímulo da resposta imune, principalmente quando utilizado por um período de 12 meses.

REFERENCES

• 1 Al-Askari S. Henry Sherwood Lawrence. In: Biographical Memoirs. Washington, D.C.: National Academy of Sciences; 2009. p. 237-55.
• ²
  Gibson J, Basten A, Van Der Brink C. Clinical use of transfer factor 25 years. Immunol Allergy Clin N A. 1983;3(2):331-57.
• ³
  Kirkpatrick CH. Therapeutic potential of transfer factor. N Engl J Med. 1980;303(7):390-1.
• ⁴
  Cosme K, González M, Gorovaya L, Soria Y, Barcelona S, Quintana M, et al. Determinación de la actividad biológica in vivo del Factor de Transferencia. Técnica alternativa. Biotecnol Apl. 2001;18( Espec.):E16.
• ⁵
  Croce CM. Oncogenes and cancer. N Engl J Med. 2008;358(5):502-11.
• ⁶
  Cook JA, Taylor D, Cohen C, Hoffmann EO, Rodrigue J, Malshet V, et al. Evaluation of effector cells mediating the antitumor action of glucan. J Reticuloendothel Soc. 1977;22(1):21-34.
• ⁷
  Diluzio NR. Macrophage glucan-activated macrophages and neoplasia. In: Altura BM, Saba TM, editors. Pathophysiology of the reticuloendothelial system. New York: Raven Press; 1981. p. 209-24.
• ⁸
  Feng H, Shuda M, Chang Y, Moore PS. Clonal integration of a polyomavirus in human Merkel cell carcinoma. Science. 2008;319(5866):1096-100.
• ⁹
  Mantovani A, Allavena P, Sica A, Balkwill F. Cancer-related inflammation. Nature. 2008;454(7203):436-44.
• ¹⁰
  Garritano CRO, Gomes JCG, Pimenteira CAP. ß1-3 Glucan no tratamento do câncer de intestino. J Bras Med. 2010;98(4):22-4.
• ¹¹
  Levine PH, Pizza G, Ajmera K, De Vinci C, Viza D. Transfer factor in virus-associated malignancies: an underestimated weapon in prevention and treatment of cancer. Adv Tumor Virol. 2002;2:7-20.
• ¹²
  Souza CA, Vigorito AC, Aranha FJP, Oliveira GB, Eid KAB, Ruiz MA. Terapêutica citoprotetora em pacientes tratados com quimio e/ou radioterapia anti neoplásica. Rev Bras Hematol.Hemoter. 2000;22(2):123-8.
• ¹³
  Patchen ML, MacVittie TJ, Souza LM. Postirradiation treatment with granulocyte colony-stimulating factor and preirradiation WR-2721 administration synergize to enhance hemopoietic reconstitution and increase survival. Int J Radiat Oncol Biol Phys. 1992;22(4):773-9.
• ¹⁴
  De Souza CA, Santini G, Marino G, Nati S, Congiu AM, Vigorito AC, et al. Amifostine (WR-2712), a cytoprotective agent during high-dose cyclophosphamide treatment of non-Hodgkin's lymphomas: a phase II study. Braz J Med Biol Res. 2000;33(7):791-8.
• ¹⁵
  Gattinoni L, Powell DJ Jr, Rosenberg SA, Restifo NP. Adoptive immunotherapy for cancer: building on success. Nat Rev Immunol. 2006;6(5):383-93.
• ¹⁶
  Rosenberg SA, Restifo NP, Yang JC, Morgan RA, Dudley ME. Adoptive cell transfer: a clinical path to effective cancer immunotherapy. Nat Rev Cancer. 2008;8(4)299-308.
• ¹⁷
  Guinn BA, Kasahara N, Farzaneh F, Habib NA, Norris JS, Deisseroth, AB. Recent advances and current challenges in tumor immunology and immunotherapy. Mol Ther. 2007;15(6):1065-71.
• ¹⁸
  Morgan RA, Dudley ME, Wunderlich JR, Hughes MS, Yang JC, Sherry RM, et al. Cancer regression in patients after transfer of genetically engineered lymphocytes. Science. 2006;314(5796):126-9.
• ¹⁹
  Ribeiro-Santos G. Quimioterapia do câncer: imunossupressão x imunoestimulação. Rev Inter Toxicol Risco Ambiental Soc. 2009;2(3):51-4.
• ²⁰
  Yoon TJ, Kim TJ, Lee H, Shin KS, Yun YP, Moon WK, et al. Anti-tumor metastatic activity of beta-glucan purified from mutated Saccharomyces cereviase. Int Immunoparmacol. 2008;8(1):36-42.

• Fonte de financiamento:

  nenhuma.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Sep-Oct 2017

Histórico

• Recebido
  16 Mar 2017
• Aceito
  01 Jun 2017