INFLUÊNCIA DAS CONDIÇÕES AMBIENTAIS NA TRANSMISSÃO DA LEPTOSPIROSE ENTRE CRIAÇÕES DE OVINOS E BOVINOS DA REGIÃO DE SOROCABA, SP^*

THE INFLUENCE OF ENVIRONMENT CONDITIONS ON THE TRANSMISSION OF LEPTOSPIROSIS BETWEEN SHEEP AND CATTLE HERDS OF SOROCABA REGION, SP, BRAZIL

RESUMO

Leptospiras excretadas pela urina podem sobreviver por longos períodos em águas de superfície e solos, na dependência do pH e teor de umidade e de matéria orgânica. Investigou-se a influência do meio ambiente na transmissão da leptospirose em dois rebanhos exclusivos de ovinos (A e C) e dois de ovinos consorciados com bovinos (F e H) da região de Sorocaba, SP, no período de dezembro de 2007 a setembro de 2008. Foram examinadas amostras de soro pela reação de soroaglutinação microscópica; de urina, água e solo pelo cultivo para leptospiras e urina de ovinos pela PCR. Condições edafoclimáticas, pH das águas de superfície e solo, granulometria e permeabilidade do solo foram analisadas. Todos os rebanhos apresentaram pelo menos um animal sororeagente para Leptospira spp. Apenas a PCR de um pool de urina de ovinos (H) foi positiva. Leptospira spp. foi isolada do lago de F. O pH das águas de superfície variou entre 6,0-7,0; e nos solos entre 4,5 e 6,8. Os índices de matéria orgânica em A, C e H variaram de 24 a 35 g/dm³, e 63 g/dm³ em F. A composição do solo de A e F mostrou-se franco-argiloarenosa, C argilosa e H franco-siltosa; como texturas mistas são capazes de manter a umidade, principalmente devido a argila. Diante da presença de animais sororeatores e portanto da circulação de Leptospira spp. nos rebanhos, conclui-se que o ciclo de transmissão é dependente da interação sinérgica e antagônica de muitas variáveis; onde o pastejo num habitat com alto teor de umidade parece ser limitante.

PALAVRAS-CHAVE
Leptospirose ovina; ovinos - pastejo bovino em conjunto; condições edafoclimáticas

ABSTRACT

Leptospires excreted by urine are able to survive for long periods in surface water and soil depending on the pH, humidity and organic matter presence. This paper reported the influence of environment conditions on the transmission of leptospirosis in two sheep-only farms (A and C) and two cattle-sheep farms (F and H) from December 2007 to September 2008. Serum samples were examined by microscopic agglutination test; urine, surface water and soil samples were cultured for leptospires, and ovine urine pools were analyzed by PCR. Regional edaphoclimatic conditions, pH of surface water and soil, granulometry and permeability of soil were analyzed. All herds presented at least one reactor to Leptospira spp. Only the PCR of an ovine urine pool of herd H was positive and Leptospira spp. was isolated from the F lake. The pH of water samples ranged from 6.0 to 7.0; while in soil it was around from 4.5 to 6.8. Soil organic matter were 24 to 35 g/dm³ in A, C e H, and 63 g/dm3 in F. Soil samples of A and F showed loamy-clay texture; C had clay soil, and H loamy-silt soil; as mixed compositions are able to maintain the humidity, mainly where clay is present. As the presence of reactors in all herds indicated the contact with Leptospira spp., it was concluded that the cycle of transmission is dependent on the synergistic and antagonistic interaction of many variables; but the close contact of animals grazing in a high humidity habitat seems to be limiting.

KEY WORDS
Ovine leptospirosis; ovine - bovine grazing together; edaphoclimatic conditions

INTRODUÇÃO

Enfermidade mundialmente distribuída, a leptos-pirose é particularmente prevalente nas Américas e considerada endêmica na América Latina e no Caribe, com impacto na economia agropecuária. A ocorrência de leptospirose está estreitamente vinculada aos fatores ambientais, que podem dar lugar a um foco de infecção, cuja amplitude está na dependência de condições favoráveis para manutenção da estirpe de Leptospira spp. (Alves et al., 1996; Genovez, et al., 2006).

Teoricamente qualquer sorovar de Leptospira spp. pode infectar qualquer espécie animal, mas na prática um número limitado de sorovares é endêmico em uma região ou país em particular. Neste caso, a infecção é determinada pelas espécies animais de contato, pelo(s) sorovar (es) existente (es) naquela propriedade ou região, pelas condições ambientais e climáticas, e ainda depende do manejo e das oportunidades de infecção direta ou indireta (Genovez, et al. 2006). Leptospiras excretadas pela urina ou provenientes de outros materiais clínicos podem sobreviver por longos períodos em solo, na dependência da umidade, pH e matéria orgânica (Faine et al., 1999).

A composição granulométrica do solo influi na capacidade de retenção da água e manutenção da umidade necessária a sua sobrevivência e multiplicação. Solos coloidais retêm a umidade e absorvem micro-organismos, presumivelmente permitindo que as leptospiras sobrevivam em condições secas. Águas da chuva e correntezas inundam as rachaduras provocadas pela dessecação, fazendo com que as leptospiras sejam liberadas para o ambiente, atingindo as águas e as camadas superficiais do solo, fechando o ciclo de infecção (Smith; Self, 1955; Karaseva, 1971; Elder et al., 1986). Em solos arenosos (partículas com diâmetro de 0,05 a 2 mm), a infiltração da água ocorre mais rapidamente o que facilita a drenagem, resultando em baixa retenção; aqueles com partícula de silte (diâmetro 0,05 a 0,002 mm) apresentam permeabilidade menor em relação à areia, porém sua capacidade de retenção é bem maior e solos argilosos (partícula com diâmetro < 0,002 mm) possuem maior capacidade de retenção de água devido à presença de poros muito menores do que nos solos arenosos, portanto, com permeabilidade menor comparada aos solos arenosos e silte.

O solo é o receptáculo final de matéria orgânica composta de resíduos de origem vegetal, animal e dos produtos das transformações que controlam a dinâmica populacional da microbiota (Faine et al., 1999; Moreira; Siqueira, 2002), influenciados pelas condições edafoclimáticas. A presença de matéria orgânica e pH próximo da neutralidade assumem grande importância na perpetuação de focos de leptospirose numa região (Radostits et al., 2000).

A presença de matéria orgânica em água e solos contaminados pela urina de animais infectados propicia um importante ambiente para a transmissão de leptospiras, que podem persistir nestas condições por até duas semanas (Henry et al., 1971). Flutuação na população bacteriana tem sido associada às variações de umidade e teor de matéria orgânica, os quais apresentam importante papel na distribuição de leptospiras. O maior número de isolados de solos ocorre onde há mais de 65% de umidade, sendo raramente positivos em solos arenoso (Torten et al. 1970 apud Henry; Johnson, 1978). A matéria orgânica se agrega melhor à argila pela característica da alta retenção de água e pela capacidade de absorver e ceder nutrientes, aumentando as características dinâmicas do solo (Lepsch, 2002). Solos arenosos são pobres em matéria orgânica por ser rapidamente mineralizada, além da alta permeabilidade e baixa retenção de umidade (Oliveira, 2005).

Na água e no solo, leptospiras patogênicas também conseguem sobreviver, dependendo do pH. No solo de plantações de cana-de-açúcar com pH ácido (6,0), leptospiras podem sobreviver por período de até sete semanas, e em solos com poças de água de chuvas, sobrevivem por até três semanas (Levett, 2001).

A ocorrência e a transmissão da leptospirose são influenciadas pelas características do agente infeccioso, à suscetibilidade de hospedeiros, concentração demográfica, movimentação, interação entre espécies e populações, finalidade de uso dos animais e, sobretudo, pelas condições ambientais que permitem sua manutenção e multiplicação (Herholz et al., 2006).

O objetivo deste trabalho foi investigar a influência das condições ambientais e edafoclimáticas regionais como predisponentes à infecção por Leptospira spp. e sua transmissão entre ovinos e bovinos.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram estudados quatro rebanhos da região de Sorocaba, SP, sendo dois de criação exclusiva de ovinos (A e C ) mestiços das raças Suffolk, Dorper e Santa Inês, de várias idades, predominantemente fêmeas, criados em regime semi-intensivo e dois de ovinos mestiços das raças Suffolk, Poll Dorset, Santa Inês e Paraíso, de várias idades, predominantemente fêmeas, consorciados com bovinos sem raça definida (H e F), criados em regime extensivo, que não haviam recebido vacinação contra leptospirose. O rebanho A, embora em pastejo, tinha acesso restrito as águas de superfície, contando com um bebedouro. Os rebanhos C, H e F tinham acesso a rios, lagos e mananciais para água de bebida, assim como pastejo em várzeas.

Na estação das chuvas foram colhidas amostras sorológicas de 100% dos animais adultos e analisadas pela Soroaglutinação Microscópica - SAM, frente a 26 sorovares segundo Ellis (1994). Para o cálculo da soroprevalência da leptospirose foram colhidas amostras de soro de 100% dos animais nos quatro rebanhos, e considerado o número de reações positivas sobre o total de animais (por espécie) da propriedade, definindo-se como o provável sorovar infectante o mais frequente e que apresentou maior título na SAM. Também durante a estação das chuvas, amostras de urina de 10% destes animais foram cultivadas para leptospiras empregando-se meios EMJH (Difco) e Fletcher (Difco) adicionados de mistura antibiótica 5-fluoracil 1% e ácido nalidíxico 4% (Alves et al., 1996) e mantidos a 30^o C por 24 horas. Um mL de cada amostra foi transferido para EMJH e Fletcher livres de antibióticos. Uma alíquota das amostras de urina foi filtrada em pré-filtro 0,45 µ e filtro Millipore 0,65 µ e três a quatro gotas do filtrado foram semeadas em tubos com EMJH, sem solução antibiótica. Outra alíquota foi submetida à diluição seriada (10^-1 a 10^-4) e semeada em meio EMJH e Fletcher sem antibióticos (Galton et al., 1962). Todos os tubos foram incubados em condições aeróbicas a 30ºC por 60 dias, com leituras semanais, em microscópio Jena Zeiss com condensador de campo escuro seco, com lente objetiva Epiplan 20 x/0,20 e de ocular 10 (100X).

Oito pools de amostras de urina de dois ou três ovinos, quatro provenientes dos rebanhos exclusivos de ovinos e quatro dos consorciados, e ainda dois pools de dois bovinos das criações consorciadas foram submetidas à técnica da Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) para detecção do DNA gênero-especifico de Leptospira spp. A extração do DNA foi realizada por fervura-fenol (Richtzenhain et al., 2002) e empregados os primers gênero específicos Lep1 e Lep2, Leptospira spp. - fragmento de 331 pb: Lep 1: 5’ GGC GGC GCG TCT TAA ACA TG 3’ e Lep 2: 3’ TTC CCC CCA TTG AGC AAG ATT 5´(Mérien et al., 1992). O gel foi corado com brometo de etídeo 0,5 µg/mL e posteriormente fotografado sob luz ultravioleta (300-320 nm) pelo sistema de foto-documentação (Câmera Kodak Digital DC/120 Zoom) e analisado com o software 1D Image Analysis (Kodak Digital Science).

Foi realizado o cultivo microbiológico de oito amostras de aproximadamente 100 gramas de solo, duas ou três por propriedade foram colhidas pela manhã, em inicio do mês de abril de 2008, às margens de regiões de pastejo próximas a alagados, lagos, rios e mananciais e ainda da pastagem central, e nove amostras de 20 mL da água de superfície que serviam de bebida e do bebedouro. As amostras de águas foram centrifugadas a 5.000 Xg por 15 minutos e uma alíquota dos sobrenadantes foi observada em microscopia de campo escuro. Um mL do restante foi cultivado como descrito para urina. Um grama da amostra de solo foi suspensa em 5 mL de água destilada estéril e alíquotas da suspensão foram cultivadas conforme protocolo para urina. Devido a extensão da propriedade C foram escolhidos dois locais para a colheita das amostras de solo.

Após a colheita, foi medido o pH das amostras de águas e das suspensões de solo.

A permeabilidade do solo (infiltrações) foi medida em abril/2008, época chuvosa, e em setembro/2008, estiagem, e realizada por meio do permeâmetro de campo de carga constante modelo IAC - Instituto Agronômico (Vieira, 1995/1998).

A análise granulométrica foi realizada segundo Camargo et al. (1986) e Van Raij et al. (1987).

A determinação de matéria orgânica e do teor de micronutrientes foi realizada pelo método Walkley-Black ( Camargo et al., 1986; Van Raij et al., 1987).

Os dados pluviométricos e as variações térmicas da região de Sorocaba, SP, constantes na Tabela 2, foram obtidos no Centro Integrado de Informações Agrometeorológicas – CIIAGRO.

Tabela 2
Observações termo-pluviométricas no período de dezembro de 2007 a setembro de 2008 da região de Sorocaba, SP, 2008.

Mês/ano		Pluviometria/chuva (mm)		Temperatura
				Média/máxima		Média/mínima
dezembro/07		245,1		27,3		16,5
janeiro/08		190		25,11		17,06
fevereiro*		50,4		26,9		16,8
março/08*		156,4		26,8		16,8
abril/08 **		85,5		23,4		15,3
maio/08		93,0		21,3		11,2
junho/o8		60,0		21,7		11,5
julho/08		0,0		24,3		9,1
agosto/08		66,0		23,3		12,4
setembro/08 **		64,0		22,3		12,3

• Fonte: www.ciiagro.sp.gov.br, vários acessos 2008.
• ^*
  colheitas sorológicas do total de animais adultos para estudo de prevalência e amostras de urina para cultivo.
• ^**
  colheita de amostras de solo das pastagens e águas para cultivo e para análise da permeabilidade e granulometria.

RESULTADOS

Nas propriedades de criação exclusivas de ovinos; o rebanho A apresentou apenas um animal sororeagente para o sorovar Pyrogenes (1/91) correspondendo a 1,1% do total de ovinos e no rebanho C, 6/37 (16,2%) sororeagentes para o sorovar Autumnalis (Tabela 1).

Tabela 1
Soroprevalência para leptospirose nos rebanhos de criação exclusiva de ovinos e consorciada com bovinos da região de Sorocaba, SP, 2008.

Identificação da propriedade		Condição do rebanho		Total de animais por espécie		Soro prevalência (%)		Sorovares prevalentes (%)		Outros sorovares
A		O		Ovinos 91		1/91 (1,1%)		Pyrogenes (1/1)		-
C		O		Ovinos 37		6/37 (16,2%)		Autumnalis (5/6)		1/6 Icterohaemorrhagiae+ Pyrogenes+ Autumnalis
F		C		Bovinos 14 Ovinos 30		9/44 (20,45%) 3/14 bovinos e 6/30 ovinos		Hardjo ou Hardjo e Wolffi (6/9)		Ovinos: 1/6 Pomona Bovinos: 1/3 Hebdomadis, 1/3 Bratislava+Shermani
H		C		Bovinos 03 Ovinos 80		21/83 (25,3%):1/3 bovinos e 20/80 ovinos		Icterohaemorrhagiae (8/21)		Ovinos: 2/20 Grippotyphosa; 1/20 Pyrogenes; 3/20 Hardjo; 4/20Autumnalis; 2/20Bratislava Bovinos: 1/1 Shermani

• ^O
  -Rebanho exclusivo de ovinos.
• ^C
  -Rebanho consorciado de ovinos e bovinos.

Nos rebanhos consorciados (Tabela 1), F apresentou 9/44 (20,45%) animais reagentes para Leptospira spp., com prevalência do sorogrupo Sejroe; sorovares Hardjo ou com ocorrência de reações cruzadas de mesma magnitude entre os sorovares Hardjo e Wolffi (6/9); e H apresentou 21/83 (25,3%) animais reagentes para Leptospira spp., sendo prevalentes os sorovares Icterohaemorrhagiae 8/21 (38,1%) , Hardjo e /ou Wolffi 4/21 (19%).

Os títulos sorológicos em ambas as condições criatórias variaram entre 50 a 3.200, sendo 1.600 para o sorovar Icterohaemorrhagiae e 3.200 para o sorovar Brastilava.

As amostras de urina não apresentaram crescimento de Leptospira spp. nas leituras semanais realizadas durante 60 dias. Apenas um dos pools de amostras de urinas dos ovinos do rebanho H foi positivo na PCR correspondendo ao DNA de Leptospira spp. (331 pb), frente ao primer gênero especifico Lep 1 e Lep 2 (Mérien et al., 1992).

Apenas de uma amostra de água de superfície da margem do lago utilizado como água de bebida para os ovinos e bovinos da propriedade F foi isolada Leptospira spp., com crescimento em EMJH e em meio de Fletcher; tendo sido também confirmada na PCR.

Os índices pluviométricos mensais e as variações de temperatura estão apresentados na Tabela 2.

As análises de permeabilidade, granulometria, índice de matéria orgânica teor de micronutrientes, pH estão apresentadas na Tabela 3.

Tabela 3
Índice de infiltração (permeabilidade), granulometria e pH do solo na época das chuvas (abril) e da estiagem (setembro) de propriedades com rebanho exclusivo de ovinos e consorciado com bovinos da região de Sorocaba, SP, 2008.

Identificação da propriedade		Condição do rebanho		Isolamento -amostras de águas e de solo		PCR Pool de urinas		Permeabilidade										Granulometria								Matéria orgânica g/dm3		PH
								Colheita de solo				Média (mm/hora)		DP		CV		Argila (%) < 0,002 mm		Silte (%) 0,053 - 0,002 mm		Areia total 2,00 - 0,053 mm		Classificação textural				Águas		Solo
A		O		N		N		Chuva		Pasto		43,23		11,89		27,50		21,4		21,1		57,4		Franco-argiloarenosa		39		7,0		4,8
								Estiagem*				45,11		14,06		31,18
								Chuva		Pasto Cl		53,52		11,08		20,70		55,6		10,4		33,9		Argila		35				4,5
C		O		N		N		Estiagem				384,97		456,99		118,71
								Chuva		Pasto		92,31		42,86		46,43												4,0
								Estiagem		central		436,70		387,72		88,78		51,1		13,1		35,9		Argila		38				4,7
										C2
								Chuva				71,42		7,52		10,53								Franco-argiloarenosa
F		C		P*		N				Pasto								21,8		19,1		59,1				63		6,0		5,9
								Estiagem				46,79		42,79		91,45
H		C		N		P**		Chuva		Pasto		24,06		8,23		34,22		24,3		55,3		20,4		Franco-siltosa		24		6,0		6,8
								Estiagem				33,08		8,57		25,92

• O-Rebanho exclusivo de ovinos, C-Rebanho consorciado de ovinos e bovinos; * na propriedade C foram realizadas duas colheitas em virtude da propriedade disponibilizar dois pastos para o rebanho; N-Negativo, P-Positivo; * Local: aguada. ** Pool de urina de ovinos; DP-desvio padrão, CV-coeficiente de variação.

DISCUSSÃO

A infecção e transmissão de leptospiras estão relacionadas às exposições aos fatores de risco ambientais, incluindo o contato com animais silvestres ou domésticos. Nos rebanhos exclusivos de ovinos alguns sorovares foram identificados pela SAM, com empate em frequência e magnitude de título, principalmente entre aqueles do sorogrupo Sejroe, Hardjo e Wolffi. No rebanho A, por se tratar de criação semiextensiva em relevo bastante irregular havia certa limitação ao acesso às águas de superfície, um único animal foi sororeagente para sorovar Pyrogenes; entretanto, nos demais rebanhos de criação extensiva e com amplo acesso às águas de superfície, observou-se maior número de animais sororeagentes a vários sorovares, discriminados na Tabela 1.

O sorovar Pyrogenes tem sido relatado em inquéritos sorológicos nas espécies bovina, ovina e suína de forma esporádica, podendo ser caracterizada infecção acidental (Favero et al., 2002; Hermann et al., 2004; Gregory et al., 2007; Castro et al., 2008).

O sorovar Autumnalis, detectado apenas nos ovinos das criações C e H, parece relacionado a uma fonte de infecção comum a esta espécie, supostamente relativa ao manejo desses animais. Nos inquéritos sorológicos para leptospirose realizados na Bahia, por Viegas et al. (1980) no Rio Grande do Norte por Azevedo et al. (2004) e no Rio Grande do Sul por Silva et al. (2007) foi verificada a prevalência deste sorovar nesta espécie animal.

O sorovar Icterohaemorrhagiae ocorreu na propriedade H, em 8/21 (3,6%) animais reatores, ovinos e bovinos. Este sorovar geralmente está relacionado à presença de roedores, bastante frequentes nas criações animais, caracterizando infecção acidental aos demais hospedeiros. Favero et al. (2002), no Estado de São Paulo, identificaram o sorovar Icterohaemorrhagiae em 0,70% (2/284) ovinos positivos e discutem o envolvimento de roedores sinantrópicos nas criações de ovinos.

O sorovar Hardjo foi detectado apenas nos animais dos rebanhos consorciados, nos quais ovinos são criados de forma extensiva em pastejo com bovinos. Genovez et al. (2006), num estudo com oito rebanhos consorciados e exclusivos de ovinos, verificaram reatividade ao sorovar Hardjo apenas nos consorciados, concluíndo que o bovino se comporta como reservatório deste sorovar e, portanto, transmissor para outras espécies, inclusive ovinos. Discordantes, portanto, de Cousins; Robertson (1986) apud Cousins et al. (1989) e de Gerritsen et al. (1994) que apontaram os ovinos como mantenedores do sorovar Hardjo.

Em um rebanho, respostas a múltiplos sorovares na SAM indicam exposições de várias origens, inclusive animais silvestres, mas não descartam a possibilidade de contágio devido à introdução de animais infectados e excretores renais como transmissores e contaminadores do meio ambiente de pastejo e de águas de bebida. Uma vez que os rebanhos não foram monitorados sorologicamente, não se pode excluir futura alteração do perfil sorológico no qual prevalecerá um sorovar infectante ou então a ocorrência de surto de leptospirose com perdas reprodutivas.

Visando avaliar a ocorrência de excreção urinária como fonte de infecção entre os animais que compartilhavam o mesmo habitat, foi aplicada a PCR em pools de urina. Apenas um pool de urina de ovinos da propriedade H confirmou que leptospiras estavam sendo excretadas para o meio ambiente. Analisando-se os resultados sorológicos dos animais que compuseram o pool positivo do rebanho H e os demais pools, foi verificado que era composto de urina de ovinos sorologicamente negativos no momento da colheita. Esta observação remete a duas hipóteses: os ovinos poderiam estar no início da infecção e, portanto, os níveis de anticorpos estariam abaixo do limiar de detecção da SAM ou, então, tratava-se de portadores renais, assintomáticos e não reagentes. De qualquer maneira, 20/80 (25%) ovinos haviam sido infectados com Leptospira spp., com prevalência para Icterohaemorragiae; portanto havia circulação e disseminação de leptospiras neste rebanho. Em suma, a excreção de leptospiras estava presente e, portanto, seria possível o isolamento não somente da urina como também das amostras de águas e solo dos locais de maior concentração de animais no pastejo.

Denota-se que a região de Sorocaba (Tabela 2) se caracteriza como clima subtropical (http://pt.wikipedia.org/wiki/Sorocaba#Clima), constantemente quente e úmido, com temperaturas amenas na maior parte do ano, não se verificando níveis extremos de frio ou calor. O índice pluviométrico regional foi analisado em relação às datas das co-lheitas sorológicas, ou seja, em 28 de fevereiro; 6, 10 e 18 de março/2008 resultando no acumulado de 206,8 mm.

A permeabilidade do solo às águas das chuvas depende diretamente da sua granulometria, textura e a composição, as quais determinam sua capacidade de manutenção do teor de umidade. O fluxo de água (permeabilidade) das pastagens das propriedades foi medido em duas épocas (Tabela 3), chuvosa e estiagem, respectivamente nos meses de abril e setembro de 2008. Solos com orifícios menores, como os solos argilosos, possuem menor permeabilidade, porém apresentam maior retenção de água; solos com orifícios maiores, como os solos formados por areia, possuem maior permeabilidade, mas não permitem maior retenção de água (Vieira; Chiba, informação pessoal). Com exceção do solo da propriedade C, cuja permeabilidade foi maior que as demais no período de estiagem, as outras propriedades apresentaram pouca variação, sendo considerados solos de composição mista do tipo argilossolo, o qual contém uma camada superficial de argila iluvial com grande capacidade de manutenção de elevado teor de umidade.

Uma vez que a temperatura e a umidade regional, devido ao índice de precipitação, quando analisadas juntamente com a permeabilidade do solo, mostraram-se propícias à manutenção de focos de leptospiras, o pH e os índices de matéria orgânica poderiam ser limitante na sobrevivência e na multiplicação da bactéria.

Diferentemente das demais propriedades que apresentavam pH das águas de superfície e de solo próximos a neutralidade, o pH na propriedade C mostrou-se ácido (média 4,0) e limitante à sobrevivência de leptospiras (Tabela 3). Gordon Smith; Turner (1961) analisaram o tempo e a sobrevivência de leptospiras em diferentes condições de pH (5,3 a 8,0). Estes micro-organismos sobreviveram de 10 a 117 dias em pH abaixo de 7,0 e de 21 a 152 dias em pH acima de 7,0; mesmo em pH 5,3, foram capazes de sobreviver por pelo menos dez dias.

A composição da matéria orgânica aparentemente não diferia nos diversos locais de pastejo onde as amostras de solo e águas haviam sido colhidas. A quantidade de matéria orgânica em F foi superior às demais propriedades (63 g/dm³), entretanto, não houve significância estatística em relação aos níveis de matéria orgânica das demais propriedades.

A região de Sorocaba, no Estado de São Paulo possui grandes reservas minerais de rochas calcárias, areia, argila e granito (São Paulo, 2003). Ferro, manganês e zinco são menos disponíveis em valores de pH acima de 7,0. Ferro, alumínio e manganês atingem níveis tóxicos em valores de pH menores que 5,0. Fósforo é menos disponível em valores altos ou baixos de pH (Moreira; Siqueira, 2002). Sendo o ferro um micronutriente importante para os organismos, a presença ou ausência deste nutriente para leptospiras pode determinar a sua sobrevivência no meio. Comparando-se os índices de micronutrientes disponíveis nos solos, pode-se observar que há disposição de ferro nos solos das propriedades A, C e F, favorecendo a permanência de leptospiras, porém inferior à H. Vieira, 1975; BradyUma vez que todos os rebanhos estavam expostos a fatores de risco para infecção por leptospiras, pois pelo menos um animal apresentava-se sororeator na SAM (Tabela 1), e que as condições edafoclimáticas sustentavam a manutenção deste agente em solo e águas de superfície, restava compreender o sucesso do isolamento de Leptospira spp. da amostra de água colhida às margens da lagoa da propriedade F em detrimento das amostras semelhantes das demais propriedades. Embora os procedimentos de cultivo para isolamento de leptospiras te-nham sido realizados de maneira a contemplar o menor número de limitações à sobrevivência e multiplicação do micro-organismo nas amostras de materiais clínicos ou ambientais, o número de isolados foi limitado. Critérios e cuidados especiais com assepsia na colheita dos materiais clínicos e também ambientais foram tomados, sendo pouco provável que tenha ocorrido contaminação com micro-organismos de microbiota animal ou ambiental. A inconsistência do isolamento indica maior complexidade da sobrevivência de leptospiras, talvez com elevada dependência da concentração da bactéria lançada ao meio ambiente e, desta forma, pequenas variações na composição ou quantidade de matéria orgânica ou pH sejam impedientes, o que explicaria o sucesso em F.

A presença de nutrientes, teor de umidade e pH próximo a neutralidade, essenciais para a manutenção de focos de leptospiras num ambiente, não foram determinantes para o sucesso na frequência de isolados.

Tabela 4
Índice de matéria orgânica e de micronutrientes nas amostras de solo de propriedades com rebanho exclusivo de ovinos e consorciado com bovinos da região de Sorocaba, SP, 2008.

Determinações						Amostras de solo
Sigla		Descrição		Unidade		A		C1		C2		F		H
M.O.		Matéria orgânica		g/dm3		39		35		38		63		24
V		Saturação de bases		%		62		38		49		90		96
P		Fósforo resina		mg/dm3		14		5		7		691		9
K		Potássio		mmolc/dm3		3,1		2,0		3,7		5,9		2,3
Ca		Cálcio		mmolc/dm3		47		21		39		144		152
Mg		Magnésio		mmolc/dm3		7		6		12		27		86
Na		Sódio		mmolc/dm3		-		-		-		-		-
Al		Alumínio		mmolc/dm3		-		-		-		-		-
H+Al		Ac. potencial		mmolc/dm3		34		47		47		20		10
S.B.		Soma bases		mmolc/dm3		57,1		29,0		45,7		176,9		250,3
CTC		Capacidade de troca vatiônica		mmolc/dm3		91,4		76,0		92,7		197,1		260,0
S		Enxofre		mg/dm3		-		-		-		-		-
B		Boro		mg/dm3		0,20		0,22		0,25		0,45		0,07
Cu		Cobre		mg/dm3		0,7		1,1		1,2		8,4		2,0
Fe		Ferro		mg/dm3		82		85		109		79		16
Mn		Manganês		mg/dm3		13,4		4,6		3,4		30,7		28,7
Zn		Zinco		mg/dm3		2,3		0,6		1,0		17,0		0,6

• *Na propriedade C foram realizadas duas colheitas em virtude da propriedade disponibilizar dois pastos para o rebanho.
  - : não detectado

Desta forma, conclui-se que a sobrevivência e multiplicação de leptospiras num habitat e sua viru-lência estariam condicionadas à resultante dos efeitos sinérgicos e antagônicos de inúmeras variáveis. Entretanto, o contato estreito proporcionado pelo aglomerado de animais excretores em pastejo num habitat com elevada retenção de água parece ser limitante para o ciclo de transmissão interespécie ou intraespécie.

• *
  Este trabalho contou com financiamento da FAPESP - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  18 Dez 2020
• Data do Fascículo
  Jul-Sep 2010

Histórico

• Recebido
  28 Dez 2009
• Aceito
  03 Ago 2010