Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, Volume: 29, Issue: 3, Published: 1987
  • Coral snake venoms: mode of action and pathophysiology of experimental envenomation Review

    Brazil, Oswald Vital

    Abstract in Portuguese:

    As cobras corais são os representantes da família Elapidae nas Américas. Classificam-se em dois gêneros Micruroides e Micrurus. O gênero Micrurus compreende a quase totalidade das espécies de cobra coral e todas as que causam acidentes no homem. Podem-se fazer as seguintes generalizações quanto aos efeitos produzidos por suas peçonhas e a algumas propriedades destas. As peçonhas das cobras corais são neurotóxicas, causando perda da força muscular e morte por paralisia respiratória. Não provocam edema local e necrose assim como não produzem coagulação sanguínea ou hemorragias. A atividade proteolítica das peçonhas de cobras corais é pequena ou nula. Exercem atividade fosfolipase A2. Não induzem efeitos nefrotóxicos. Os componentes tóxicos da peçonha das Elapidae são as neurotoxinas pré-sinápticas, as neurotoxinas pós-sinápticas, as cardiotoxinas e fosfolipases A2 com atividade mionecrótica ou semelhante à das cardiotoxinas. O modo de ação das peçonhas de Micrurus frontalis, M. lemniscatus, M. corallinus e M. fulvius foi investigado em preparações neuromus-culares isoladas e é aqui exposto. Mostra-se que enquanto as peçonhas de M. frontalis e M-lemniscatus devem conter apenas toxinas que atuam através de ligação com os receptores co-linérgicos da placa terminal (neurotoxinas pós-sinápticas), a de M. corallinus atua também na junção neuromuscular inibindo a liberação de acetilcolina pelos impulsos nervosos e a de M. fulvius induz despolarização da membrana das fibras musculares. Relatam se também os efeitos produzidos pelas peçonhas de M. corallinus e M. fulvius in vivo em cães e os provocados pela peçonha de M. frontalis em cães e macacos.

    Abstract in English:

    Coral snakes, the New World Elapidae, are included in the genera Micniroides and Micrurus. The genus Mlcrurus comprises nearly all coral snake species and those which are responsible for human snake-bite accidents. The following generalizations concerning the effects induced by their venoms, and their venom-properties can be made. Coral snake venoms are neurotoxic, producing loss of muscle strenght and death by respiratory paralysis. Local edema and necrosis are not induced nor blood coagulation or hemorrhages. Proteolysis activity is absent or of very low grade. They display phospholipase A2 activity. Nephrotoxic effects are not evoked. The main toxins from elapid venoms are postsynaptic and presynaptic neurotoxins and cardiotoxins. Phospholipases A2 endowed with myonecrotic or cardiotoxin-like properties are important toxic components from some elapid venoms. The mode of action of Micrurus frontalis, M. lemniscatus, M. corallinus and M. fulvius venoms has been investigated in isolated muscle preparations and is here discussed. It is shown that while M. frontalis and M. lemniscatus venoms must contain only neurotoxins that act at the cholinergic end-plate receptor (postsynaptic neurotoxins), M. corallinus venom also inhibits evoked acetylcholine release by the motor nerve endings (presynaptic neurotoxin-like effect) and M. fulvius induces muscle fiber membrane depolarization (cardiotoxin-like effect). The effects produced by M. corallinus and M. fulvius venoms in vivo in dogs and M. frontalis venom in dogs and monkeys are also reported.
  • Tuberculosis in patients with chronic renal failure Original Articles

    Paula, Flávio Jota de; Azevedo, Luiz Sérgio Fonseca de; Ianhez, Luiz Estevam; Romão Júnior, João Egidio; Chocair, Pedro Renato; Sabbaga, Emil

    Abstract in Portuguese:

    Nove casos de tuberculose (TBC) foram diagnosticados entre 800 pacientes urêmicos acompanhados durante um período de 11 anos. Isto constituiu uma prevalência de 1,125%, 2,5 vezes maior que aquela da população geral. Seis pacientes (66,7%) tiveram comprometimento dos linfonodos (4 cervicais e 2 mediastinais). Três pacientes (33,3%) tiveram acometimento pulmonar (2, pleuro-pulmonar e 1, apical). Oito pacientes estavam em diálise e 1 estava na fase pré-dialítica. A duração do tratamento dialítico variou de 1 a 60 meses. Três pacientes receberam imunossupressão previamente por transplante renal mal sucedido. Febre diária esteve presente em todos pacientes, menos em um que era assintomático e cuja TBC foi suspeitada após uma radiografia de tórax rotineira anormal. Biópsia foi o procedimento diagnóstico em 7 pacientes (77,8%). Quatro foram biópsias diretas de linfonodos cervicais, 2 de linfonodos mediastinais realizadas através de mediastinos-copia e uma da pleura. Em 2 outros pacientes a TBC foi confirmada pela presença do bacilo da tuberculose; em 1 caso no escarro e em outro no lavado brônquico. Esquema tríplice foi empregado em todos os casos (isoniazida e etam-butol em todos mais rifampicína em 8 e estreptomicina em 1). Um paciente teve icterícia e outro neurite óptica. Cinco pacientes se curaram. Os outros 4 faleceram durante o tratamento por causas não relacionadas à TBC ou seu tratamento.

    Abstract in English:

    Nine cases of tuberculosis (TB) were diagnosed among 800 uremic patients, followed-up during 11 years, a prevalence of 1125%, 2.5 times higher than that in the general population. Six patients (66.7%) had lymph node involvement (4 cervical and 2 mediastinal). Three patients (33.3%) had pulmonary involvement (2 pleuro-pulmonary and 1 bilateral apical pulmonary). Eight patients were undergoing dialysis and 1 was pre-dialytic. The duration of dialysis ranged from 1 to 60 months. Three patients had previously received immunosuppressive drugs for unsuccessful renal transplantation. Daily fever was present in all but one patient; he was asymptomatic and TB was suspected after routine chest radiography. Biopsy was the diagnostic procedure in 7 patients (77.8%), four by direct cervical lymph node biopsy, 2 by mediastinal, performed by mediastinoscopy and 1 by pleural biopsy. In 2 other patients TB was confirmed by the presence of tubercle bacilli; in sputum (1 patient) and in a bronchial flushing specimen (the other patient). Triple therapy was used in all patients (isoniazid and ethambutol in all), plus rifampicin in 8 and streptomycin in 1. One patient had jaundice and another had optical neuritis. Five patients were cured. The other four died during treatment of causes unrelated to TB or its treatment.
  • Histopathological patterns of the liver involvement in visceral leishmaniasis Original Articles

    Duarte, M. I. S.; Corbett, C. E. P.

    Abstract in Portuguese:

    As alterações hepáticas observadas no fígado em material de biópsia ou necropsia de 47 pacientes com leishmaniose visceral nos permitiu definir três padrões histopatológicos diferentes de acometimento hepático: típico, nodular e fibrogênico. Estes padrões parecem ser representativos de diferentes formas evolutivas do acometimento hepático na doença para uma evolução mais benigna ou para uma evolução mais crônica com fibrose e "cirrose". Estas formas histopatológicas evolutivas estão relacionadas ao prognóstico da doença.

    Abstract in English:

    The hepatic changes observed in liver specimen from either biopsy or necropsy of 47 patients with visceral leishmaniasis permited us to define three different histopathological patterns of involvement: typical, nodular, and fibrogenic. These patterns seem to be representative of different evolutive stages of the hepatic involvement in the disease either towards a more benign evolution or to more chronic stage with fibrosis and "cirrhosis". These histopathological evolutive stages are related to the prognosis of the disease.
  • Botulismo: considerações acerca de oito casos ocorridos no Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brasil Artigos Originais

    Ferreira, Marcelo Simão; Nishioka, Sérgio de Andrade; Almeida, Alair Benedito de; Silveira, Paulo Vitor Portella; Souza, Marcos César de; StortiI, Pedro Carlos; Zenebon, Odair; Gelli, Dilma Scala; Souza, Aldo de

    Abstract in Portuguese:

    O botulismo constitui uma forma rara de intoxicação alimentar, particularmente em nosso meio. A única epidemia comprovada desta doença no Brasil ocorreu na década de 1950, no Rio Grande do Sul, onde nove pessoas a adquiriram, após a ingestão de conserva caseira de peixe. O presente estudo relata um surto de Botulismo tipo A ocorrido em uma família de 8 membros, dos quais 7 contraíram esta toxinfecção após a ingestão de carne suína conservada sob a forma de enlatado caseiro. Duas pessoas evoluíram para o óbito, e os restantes recuperaram-se após variável tempo de evolução. Onze meses após, diagnosticou-se novo caso desta doença, cuja fonte da intoxicação não pôde ser detectada Os autores pretendem com esta publicação, divulgar a segunda epidemia comprovada de Botulismo no Brasil, e chamar atenção para seu quadro clínico, diagnóstico e tratamento, praticamente desconhecidos em nosso meio.

    Abstract in English:

    Botulism constitutes a rare form of intoxication, particularly in our country. The only confirmed outbreak of this disease in Brazil occurred in the 50's in Rio Grande do Sul where nine persons acquired the disease after ingestion of home-canned fish. The present work reports an outbreak of type A botulism which occurred in eight members of the same family of whom seven contracted this food toxic infection after ingestion of home-canned pork. Two persons died and the others recovered after variable time of evolution. After eleven months a new case of botulism was diagnosed, but the source of this intoxication could not be found. The authors intend with this work to divulge the second confirmed outbreak of botulism in Brazil and to direct a special attention to ootulism clinical pictures, diagnostic and treatment pratically unknown in our country.
  • Caracterização de cepas de plasmodium falciparum do Estado de Rondônia, Brasil, utilizando microtestes de sensibilidade aos antimaláricos, tipificação enzimática e anticorpos monoclonais Artigos Originais

    Di Santi, S. M.; Boulos, M.; Vasconcelos, M. A.; Oliveira, S.; Couto, A.; Rosario, V. E.

    Abstract in Portuguese:

    Nove amostras de Plasmodium falciparum foram coletadas de migrantes infectados no Estado de Rondônia. Estas amostras foram mantidas em cultivo para caracterização por tipificação enzimática em acetato de celulose, sensibilidade á cloroquina, amodiaquina, mefloquina e quinino e análise da diversidade antigê-nica através de anticorpos monoclonais específicos. Os resultados obtidos mostraram variação entre todas as amostras estudadas: encontrou-se resistência crescente à cloroquina, resistência intermediária à amodiaquina e quinino e sensibilidade a baixos níveis de mefloquina; apenas dois isolados mostraram sensibilidade a todas as drogas. A tipificação enzimática mostrou presença de parasitas GPI 1 e 2 e ADA 1 e 2, enquanto que para PEP e LDH todas as amostras foram do tipo 1. Sorotipagem com anticorpos monoclonais PSA mostrou presença de três sorotipos diferentes (II, III e IV). Estes resultados mostraram: a) variação entre as amostras para os marcadores analisados; b) nesta região, para o pequeno número de amostras analisadas, não foram observadas diferenças significativas ou novos tipos de parasitas.

    Abstract in English:

    Nine samples of Plasmodium falciparum were collected from migrant workers who were infected in the State of Rondônia, Brazil. These samples were maintained in culture for characterization by enzyme typing using acetate cellulose electrophoresis, drug susceptibility to chlo-roquine, amodiaquine, mefloquine and quinine and antigenic diversity analysis using strain specific monoclonal antibodies. The results obtained have confirmed major variation among all samples studied: it was found consistent resistance to chloroquine moderated resistance to amodiaquine and quinine and susceptibility to low levels of mefloquine; only two isolates have shown susceptibility to all drugs in the in vitra assays. Enzyme typing showed presence of both GPI 1 and 2 and ADA 1 and 2 parasites, while for PEP and LDH all samples were type 1. Se-rotyping with PSA monoclonal antibodies showed presence of three different serotypes (II, III and IV). These results confirm: a) variation among samples for markers analysed; b) in this area and for the small number of samples studied, no significant differences or new types of parasites were seen.
  • Schistosoma mansoni: resistência cutânea em camundongos portadores de infecção primária Artigos Originais

    Gerken, Sílvia E.; Mota-Santos, Tomaz A. da

    Abstract in Portuguese:

    No presente trabalho avaliou-se a resistência cutânea de camundongos ao Schistosoma mansoni, usándose a orelha como sítio de infecção e de recuperação de esquistossômulos através da incubação de seus fragmentos em recipiente posto em contacto com Elac tamponado com Hepes. Essa técnica mostrou-se eficiente na discriminação do número de esquistossômulos recuperados de camundongos normais e de camundongos previamente infectados (camundongos imunes), quando comparada à técnica de recuperação de parasitas através da digestão da pele em meio contendo colagenase. Através dessa técnica, verificou-se que camundongos imunes reduzem o parasitismo do primeiro ao sétimo dia após a reinfecção (42 a 46%). Essa resistência foi observada em portadores de infecção bissexuada (6.* a 15.ª semanas) e unissexuada (33.* e 34.ª semanas) e em linhagens isogênicas (C57 BL/10, CBA e Fj do cruzamento CBA x DBA/2) e não isogênica (Swiss). Revelándose apropriadas ao estudo da resistência anti-esquistossomótica que se manifesta ao nível da pele, sugere-se que orelhas possam ser utilizadas como via de infecção em experimentos que visem analisar os fatores que participam da imunidade de camundongos ao S. mansoni.

    Abstract in English:

    Evaluation of the cutaneous resistance of mice to Schistosoma mansoni -was performed using the pinna of the ear as the site of infec-tion and recovery of schistosomules by incuba ting the ear fragments in Hepes-buffered. Elac medium. This method was found to be effective for counts of recovered schistosomules in normal and previously infected (immune) mice when compared with the technique of skin digestion in a collagenase containing medium. A decrease of 42% to 46% of the parasitism was shown to occur in immune mice from days 1 to 7. This resistance was observed in mice with bisexual (6-15 weeks) and unisexual (33-34 weeks) infections, as well as in inbred (C57 BL/IO, CBA and F, from CBA x CBA2 crossing) and outbred Swiss animals. Since the pinna of the ear proved to be very useful in the study of antischistosomotic resistance in mice, at skin level, it is suggested that it should be utilized as standard infection route to study the factors affecting the immunity to S. mansoni in mice.
  • Estudo do comportamento biológico de três amostras de trypanosoma cruzi isoladas de pacientes do instituto "dante pazzanese" de cardiologia Artigos Originais

    Pereira, Vera Lúcia; Zamorano, Mabel M. B.; Boainain, Elias

    Abstract in Portuguese:

    Foram estudadas três amostras de Trypanosoma cruzi isoladas de pacientes. As amostras foram observadas sob os seguintes parâmetros: níveis parasitêmicos, morfologia das formas sanguíneas, alterações histopatológicas, virulência e mortalidade em camundongos. A amostra IDPC-1 foi isolada de um paciente naturalmente infectado e tratado com benzonidazol. Provocou baixos índices parasitêmicos e mostrou baixa virulência, sendo que 83,4% dos animais evoluiram para a fase crônica. Os tripomastigotas eram de forma delgada, tornando-se largas ao final da fase aguda. Mostrou-se como miotrópica, pois as reações inflamatórias foram mais evidenciadas em células musculares persistindo ainda na fase crônica. A amostra IDPC-3 foi isolada anteriormente ao tratamento quimioterápico, de um paciente com infecção aguda por via transfusional. Causou altos níveis parasitêmicos e mostrou alta virulência com mortalidade total até o 12.° dia. As formas delgadas foram predominantes e foi caracterizada como retieulotrópica, por apresentar severa inflamação e parasitismo em linfonodos, baço e fígado A amostra IDPC-2 foi isolada de um paciente infectado por via transfusional, após o tratamento com três diferentes esquemas terapêuticos. Apresentou moderada virulência, com mortalidade total até o 17° dia e predominância de formas delgadas em todo decurso da infecção; contudo os índices parasitêmicos foram baixos. Houve uma severa reação inflamatória e parasitismo sistêmicos, porém mais evidenciados em células musculares, mostrando-se como miotrópica. Esta amostra apresentou comportamento biológico similar a IDPC-3, com pequenas divergências como baixos índices parasitêmicos e tendência ao miotropismo. Estes dados sugerem que amostras de T. cruzi isoladas de pacientes considerados fracasso terapêutico apresentam padrões de comportamento biológico similares a outras cepas já estudadas, porém provocam infecção menos severa no animal experimental, fazendo supor que drogas tripanosomicidas poderiam alterar padrões de comportamen to, promovendo melhor adaptação entre parasita-hospedeiro.

    Abstract in English:

    The biological behaviour of three different T. cruzi samples isolated from patients through xenodiagriosis was observed. Samples were studied considering parameters such as parasi-temic levels, morphology of blood forms, histo-pathological changes, virulence and mice mortality The IDPC 1 sample isolated from a naturally infected patient, who had been treated with benzonidazole, showed low virulence. 83,4% of the animals reached the chronic phase and had low parasitemic levels. In the beginning of the infection trypomastigote forms were slender, but they became broad at the end of the acute phase. Histologically the IDPC 1 sample was myo-tropie as shown by the inflammatory reaction in the muscle cells during the chronic phase. The IDPC 3 sample was isolated from a patient infected by transfusion before chemothe-lapeutic treatment. This sample presented high virulence with total mortality within twelve days and high parasitemic levels with a predominance of slender forms Because of a severe inflammation and parasitism of lymph nodes, spleen and liver that sample was characterized as reticulotropic. The IDPC-2 sample was also isolated from a patient infected by transfusion who had three different chemotherapeutic treatment programs. Tins last sample presented moderate virutence with total mortality within seventeen days. Although the parasitemic levels were low during the evolution of the infection, slender forms were observed Severe systemic inflammation occurred and also intense tissue parasitism This parasitism was higher in mus cles, showing itself to be myotropie. Biological behaviour, in this sample, was similar to the IDPC 3 sample. However two main divergences were observed: low parasitemic levels and a my o tropic tendency. T. cruzi samples, which were isolated from patients considered as therapeutic failures, appear, in this research, to have similar biological behaviour patterns to other strains already studied. However, the former cause an infection which is not so severe in the experimental animal. This suggests that drugs could affect the biological behaviour and as such favouring a better host parasite relationship.
  • Chronic glomerulonephritis associated with hepatosplenic schistosomiasis mansoni Original Articles

    Ramos, Eduardo Antonio Gonçalves; Andrade, Zilton A.

    Abstract in Portuguese:

    Numa série de 36 casos de doença renal em portadores de esquistossomose hépato-esplê-nica, os tipos histológicos de glomerulonefrite encontrados foram os seguintes: mesângio-capilar (33,2%), proliferativa mensagial (25,0%), esclerose glomerular focal (16,7%) e glomeru-lonefrite esclerosante (8,3%). Quando estes tipos e números foram comparados com aqueles obtidos de um grupo controle de 36 casos de glomerulonefrite sem associação com a esquistossomose hépato-esplênica, não foram verificadas diferenças estatisticamente significantes, a não ser em relação à glomerulonefrite proliferativa endocapilar que apareceu muito mais frequentemente no grupo controle. Assim sendo, a idéia de que a glomerulonefrite mesângio-capilar está especificamente associada com a esquistossomose não se consubstanciou. Todavia, quando se consideram juntos os dois grupos de gomerulonefrite com envolvimento predominantemente mesangial (mesângio-capilar e proliferativa mensagial), há uma nítida predominância dos mesmos nos casos associados com a esquistossomose hépato-esplênica. Este dado pode estar ligado à existência de imuno-complexos de grande peso molecular, os quais tendem a se depositar no me-sângio, como parece ser o caso com as glome-rulonefrites associadas com infecções parasitárias em geral.

    Abstract in English:

    In a series of 36 cases of renal disease associated with hepatosplenic schistosomiasis the following morphologic types of glomerulonephritis were found: mesangio-capillary (33.2%), mesangial proliferative (25.0%), focal glomerular sclerosis (16.7%) and sclerosing glomerulonephritis (8.3%). No significant statistical differences were found when these results were compared with those from 36 cases of glomerulonephritis not associated with hepatosplenic disease. On the other hand, endocapillary glomerulonephritis was found to be predominant in the latter group of cases. These results did not substantiate the assumption that mesangio-capillary glomerulonephritis is specifically related to hepatosplenic schistosomiais. However, if the types of glomerulonephritis that predominantly involve the me-sangium are considered together, they are significantly associated with hepatosplenic schistosomiasis. Mesangial involvement is known to occur in other parasitic diseases and that may be related to a common immunopathogenesis.
  • Fiebre "Q" en Uruguay

    Moreira, R. E. Somma; Caffarena, R. M.; Perez, Graciela; Saldas, Silvana Somma; Monteiro, Marina

    Abstract in Spanish:

    Los autores hacen una revisión de la problemática referida a la fiebre Q, tanto desde el punto de vista clínico como epidemiológico. El primer caso nacional se comunicó en el año 1956, en un adulto, obrero de frigorífico. En 1966 se comunica el primer caso en un niño. A partir de esa fecha se realizan varias encuestas serológicas en humanos y en animales. En seres humanos los hallazgos varían entre 4.2% y 5.5% según el año estudiado. En animales se hallaron valores que oscilaron entre 0.9% (animal para abasto) y 30% (animal tipo industria) para bovinos. En ovinos, en el único estudio se halló un 10.3% de positivos. En equinos los valores de positividad variaron de 5.5% a 21.7%. En suinos se refiere un porcentaje de positividad del 21.2% en la primera encuesta, sendo en la más reciente del 0.0%. En aves y cobayos no se evidenciaron sueros positivos. Entre 1975 y 1985 los autores estudiaron 14 brotes en seres humanos en esta-blecimentos de procesamiento de carne, con un total de 1358 casos estudiados, habiéndose confirmado el 60% de ellos. Pasan revista a la sintomatologia común, así como el tipo de tarea de los pacientes. Para los estudios serológicos, como los diagnósticos de los casos clínicos, los autores utilizaron la fijación del complemento, la aglutinación capilar y la microa-glutinación en lámina.

    Abstract in English:

    The authors review the conditions concerning "Q" fever, both from the clinical and epidemiological point of view. The first national case was communicated in 1956, the affected subject being an adult worker from a meat processing plant. In 1966 the first case on a child was described. From then on, several serological surveys v/are carried out on human beings and on animals. Concerning human beings positive results ranked from 4.2% to 5.5%, depending on the year the study was made. In animals, the values rank from 0.9% (local consumption animals) to 30% (industrial type animals) as far as bovines are concerned. As for ovines, in the single study performed, a 10.3% rate of positive findings was reached. In horses, the positive finding rate ranked from 5.5% to 21.7%. A positive rate of 21.2% was the result of the first survey in swines. A more recent one showed 0.0%. Neither fowls nor guinea pigs showed positive sera. Between 1975 and 1985, 14 meat plant outbreaks were studied and the results showed that, of a total a 1358 human cases studied, 60% of them were positive. The patient's most common symptomatology and the nature of the task performed are also listed. Both for the serological studies and for the diagnosis of the clinical cases, the authors use the complement fixation, the capillar agglutination and the layer microagglutination. This last technique was previously described by the authors 21.
  • Febre purpúrica brasileira: resultados preliminares da investigação etiológica Epidemiologia

    Irino, K.; Lee, I. M. L.; Kaku, M.; Brandileone, M. C. C.; Melles, C. E. A.; Levy, C. E.; Berkley, S. E.; Fleming, D. W.; Silva, G. A.; Harrison, L.

    Abstract in Portuguese:

    Em várias regiões do interior do Estado de São Paulo, notificou-se a partir do final de 1984 a 1986, a ocorrência de doença até então desconhecida, com características clínicas, em muitos aspectos, semelhante à meningococcemia. Esta síndrome foi denominada Febre Purpúrica Brasileira (FPB). Em quinze dos casos com quadro clínico compatível com a síndrome, o Haemophilus aegyptius foi isolado a partir de culturas de sangue, de líquido cefalorraquidiano sanguinolento, de secreção conjuntival e orofaríngea. Analisa-se a importância deste achado, face à existência de somente um relato na literatura, de infecção sistêmica por bactérias desta espécie.

    Abstract in English:

    In the hinterland of the São Paulo State, Brazil, a so far non observed disease has been reported from 1984 to 1986. The disease had the clinical characteristics of meningococcemia and the syndrome was named Brazilian Purpuric Fever. In fifteen patients Haemophilus aegyptius was isolated from blood cultures, spinal fluid and conjunctival and oropharyngeal secretions. This paper analyses the importance of such findings in relation to one single previous report of a systemic infection caused by such bacteria.
  • Avaliação de antígenos do Trypanosoma Cruzi para a reação de hem aglutinação indireta: I. diferentes extratos antigênicos Imunologia

    Vítor, Ricardo Wagner de Almeida; Chiari, Egler

    Abstract in Portuguese:

    Alguns procedimentos descritos na literatura (ultrasom, água destilada, NaOH, TRITON x 100 e congelamento-descongelamenao) foram avaliados determinando o melhor extrato antigênico para a reação de hemaglutinação indireta (RHI) no diagnóstico sorológico da doença de Chagas. Para isso, foram ensaiados 30 soros de indivíduos chagásicos e 30 soros de indivíduos não chagásicos. A reação de imuno-fluorescência indireta foi considerada como reação de referência no cálculo dos indices de co-positividade (i.c.p.) e co-negatividade (i.cn.). O valor do i.c.p, para a RHI com antígeno obtido por NaOH foi mais elevado do que para os outros antígenos. Os cinco antígenos apresentaram valores máximos para o i.cn., indicando boa especificdade. Os títulos apresentados pelos soros chagásicos com antígeno obtido por NaOH foram, significativamente, superiores aos demais antígenos. A avaliação de cinco partidas de antígeno extraídas por NaOH em épocas diversas indicam boa sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade de resultados, traduzidas pelos valores elevados para os i.c.p. e i.cn., além de títulos próximos entre si.

    Abstract in English:

    To improve the sensitivity and specificity of the indirect hemagglutination test (IHA) for the serodiagnosis of Chagas' disease some previously described procedures (sonication, destil-led water, NaOH, TRITON x 100, freezing and thawing) were tested to determine the most useful antigenic extract. Sera of 30 individuals with chronic Chagas' disease, demonstrated by immunofluorescence test, and sera of 30 non •chagasic individuals were assayed. The immunofluorescence test (IFT) was the reference test to evaluate the co-positivity index and co-negativity index. Co-positivity results were better when the NaOH antigen was used. All antigens gave maximum values for co-negativity in relation to IFT. Titers presented by sera from cha-gasics tested by IHA with NaOH antigen were higher than those of the other four antigens. Moreover, reliability of IHA with NaOH antigen was indicated by the sensitivity, specificity and reproducibility observed with five different reagent batches prepared with antigens extracted on different days.
  • Avaliação de antígenos do trypanosoma cruzi para a reação de hemaglutinação indireta: II. Antígenos de diferentes amostras e formas evolutivas Imunologia

    Vítor, Ricardo Wagner de Almeida; Chiari, Egler

    Abstract in Portuguese:

    Para aprimorar a sensibilidade e a especificidade da reação de hemaglutina-ção indireta no diagnóstico da doença de Chagas, foram utilizados eritrocitos sensibilizados com antígeno de epimastigotas de diferentes amostras (clones Al.7, B12, Cl e cepas D150 e Y), de tripomastigotas metacíclicos de cultura (TMC) e de tri-pomastigotas de cultura de células (TCC) do Trypanosoma cruzi. Foram titulados 132 soros de indivíduos chagásicos e 161 soros de não chagásicos, diagnosticados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), considerada como reação de referência no cálculo dos índices de co-positividade (i.c.p.), co-negatividade (i.c.n.) e concordância. Utilizando o título discriminante (T.D.) de 1:40, os antígenos da cepa Y e do clone B12 apresentaram valores elevados para os três índices calculados, indicando boa sensibilidade e especificidade em relação à RIFI. Os antígenos dos clones Al .7 e Cl apresentaram baixa especificidade considerando o T.D. de 1:40, mas ocorreu um aumento acentuado para o i.c.n. considerando o T.D. de 1:80, indicando um aumento de especificidade relativa sem alteração significativa da sensibilidade relativa. Com os antígenos T.M.C, e T.C.C, foram observados títulos mais baixos e valores menores para o i.c.p., indicando pouca sensibilidade em relação à RIFI.

    Abstract in English:

    To improve sensitivity and specificity of the indirect hemagglutination test (IHA) for Chagas' disease serodiagnosis, different antigens of Trypanosoma cruzi extracts from epimastigotes (A1.7, B12 and CI clones; Y and D150 strains) and from trypomastigotes (metacyclics and tissue cell cultures) -were tested. Sera of 132 individuals with chronic Chagas' disease, demonstrated by immunofluorescence test (IFT) and sera of 161 non chagasic individuals were assayed. The IFT was the reference test to evaluate the co-positivity index (c.p.i.) and co-negativity index (c.ni.). The antigens of Y strain and B12 clone presented high values for the calculated index with a cut off of 1:40, suggesting sensitivity, specificity and agreement of IHA in relation to IFT. Antigens of A1.7 and CI clones presented high values for the calculated index only with a cut off of 1:80. Titers presented by sera from chagasics tested by IHA with trypomastigote antigens were lower than those with epimastigote antigens. Trypomastigote antigens gave lower values for co-positivity index, suggesting little sensitivity in relation to IFT.
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